RESUMO
Meningoencephalitis caused by Bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5) is responsible for heavy economic losses in the cattle industry. As in other Alphaherpesviruses, the envelope glycoprotein IV (gD), which mediates penetration into host cells, is one of the major candidate antigens for a recombinant vaccine, since it induces a strong and persistent immune response. The DNA coding for a truncated form of BoHV-5 gD (tgD) has been cloned into the Pichia pastoris expression vector pPICZalphaB to allow protein secretion into the medium. After induction with methanol, a approximately 55kDa protein was obtained. Enzyme deglycosylation with Endo H showed a smaller size band in SDS-PGAE, with approximately 50kDa, suggesting that tgD has N-linked oligosaccharides and that it is not hyperglycosylated. The approximately 55kDa protein was recognized by several polyclonal antibodies, including polyclonal antibody anti-tgD and polyclonal antibodies of different animal species immunized with BoHV-5 and BoHV-1. This is the first report of BoHV-5 gD expression in yeast. It was shown that the recombinant truncated form of BoHV-5 gD has antigenic and immunogenic properties similar to the native BoHV-5 gD. Expression of tgD as a secreted protein allows simple and inexpensive purification methods that can be used for further studies to evaluate its immunogenicity in cattle.
Assuntos
Herpesvirus Bovino 5/genética , Proteínas do Envelope Viral/genética , Animais , Anticorpos Antivirais/imunologia , Bovinos , Clonagem Molecular , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Expressão Gênica , Glicosilação , Peso Molecular , Pichia/genética , Proteínas Recombinantes/química , Proteínas Recombinantes/genética , Proteínas Recombinantes/imunologia , Proteínas Recombinantes/isolamento & purificação , Proteínas do Envelope Viral/química , Proteínas do Envelope Viral/imunologia , Proteínas do Envelope Viral/isolamento & purificaçãoRESUMO
Many cases of sporotrichosis in cats were diagnosed in the town of Rio Grande, RS, Brazil, caused mainly by inoculation due to scratches. In this work, we evaluated the frequency of Sporothrix schenckii in the nails of healthy cats living together with cats showing clinical sporotrichosis. The isolation of the fungus was carried out pressing unwashed nails of the forelimbs of 24 cats (48 paws) directly onto the surface of Mycobiotic Agar in Petri dishes. S. schenckii was isolated from seven (29.1 percent) cats. The procedure for isolation of the fungus was simpler than methods that require sedation and cuts of the nails.
Um número elevado de casos de esporotricose em gatos foi diagnosticado na cidade de Rio Grande/RS/Brasil, e na maioria dos animais, a doença ocorreu após inoculação do fungo a partir de arranhões. Nesse estudo, avaliou-se a freqüência de Sporothrix schenckii nas unhas de gatos saudáveis que conviviam com gatos com esporotricose. O isolamento do fungo foi realizado a partir da impressão das unhas dos membros torácico direito e esquerdo, de 24 gatos (48 patas), diretamente em placas de Petri com Agar Mycobiotic sem lavagem prévia das unhas. S. schenckii foi isolado de sete gatos (29,1 por cento). O procedimento adotado para o isolamento do fungo foi mais simples que os procedimentos que requerem sedação e corte das unhas do animal.
Assuntos
Gatos , Esporos Fúngicos/isolamento & purificação , Técnicas In Vitro , Unhas , Sporothrix , Esporotricose , Estudos Transversais , MétodosRESUMO
A esporotricose é uma micose subcutânea resultante da inoculação do fungo Sporothrix schenckii na pele e tecido subcutâneo. Micoses como a esporotricose podem comportar-se de forma oportunista em indivíduos imunossuprimidos. O presente trabalho teve como objetivo relacionar esporotricose e vírus da leucemia felina (FeLV) em 18 gatos, de um total de 90 criados em ambiente úmido, cercado por vegetação e pouca incidência solar. Para o diagnóstico micológico foram colhidos fragamentos e exsudato das lesões e para o diagnóstico da FeLV, pela técnica de imunofluorescência indireta, colheu-se sangue. A FeLV foi pesquisada em 18 gatos com esporotricose. Quatro animais (22,2
